大鼠椎間盤纖維環細胞公司正在出售的產品：對 規格： 100mg
776-86-3異莨菪亭;Isoscopoletin 規格： 10mg
33570-04-6白果內酯 規格： HPLC≥98%;20mg
富馬芬 規格： 50mg
514-47-6大戟二烯;euphol 規格： 20mg
乙型副傷寒門氏菌 規格： 凍干粉
紫杉肽 規格： HPLC≥98
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 大鼠椎間盤纖維環細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1278 |
商品介紹：
名稱 大鼠椎間盤纖維環細胞 2.組織來源：椎間盤組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠椎間盤纖維環細胞分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚，而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶，后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3，其外層的細胞呈梭型，主要屬于纖維細胞，內層細胞呈圓形，主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現，它們的核較圓，核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒，纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少，纖維環的生物性能就會減弱，椎間盤開始退變。 5.方法簡介： ()實驗室分離的大鼠椎間盤纖維環細胞采用膠原酶-中性聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的大鼠椎間盤纖維環細胞經Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R200 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
氯化鎂孔雀綠肉湯（MM） Rappaport-Vassiliadis Medium 250g
1g 二硫赤蘚醇 DTE 4℃保存
50T 對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
1張 硝酸纖維素膜，13×20 cm（Tiandz） Nitrocellulose Membrane 常溫保存
2 ug RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen1 RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen1 低溫運輸，-20℃保存
200次 微量樣品盒 Tiny S?嵌?L?
大鼠椎間盤纖維環細胞mEC肉湯 英文名稱：mE.Coli Broth 產品規格：250g 豬肝細胞生長因子(HGF)免疫試劑盒*直銷
mTSB肉湯 英文名稱：mTSB Broth With Novobiocin 產品規格：250g 豬甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒進口、組裝
改良醇麥康凱(CT-SMAC)瓊脂 英文名稱：Modified Sorbitol Maconkey Agar 產品規格：250g 豬鈣/鈣調素依賴性蛋白激2δ(CAMK2D)免疫試劑盒進口、分裝
改良醇麥康凱瓊脂添加劑 英文名稱：Modified Sorbitol MacConkey Agar Additives 產品規格：1ml*5支 豬鈣/鈣調素依賴性蛋白激2γ(CAMK2G/CAMKG)免疫試劑盒現貨供應
改良EC肉湯(mEC+n) 英文名稱：Modified EC Broth 產品規格：250g 豬鈣/鈣調素依賴性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫試劑盒*直銷
半固體瓊脂 英文名稱：Semi-solid agar 產品規格：250g 豬鈣/鈣調素依賴性蛋白激2α(CAMK2A/CAMKA/KIAA0968)免疫試劑盒進口、組裝
醇麥康凱瓊脂基礎（SMAC） 英文名稱：Sorbitol Maconkey Agar Base 產品規格：250g 豬脯羥化(PHD)免疫試劑盒進口、分裝
改良麥康凱肉湯（CT-MAC） 英文名稱：Modified MacConkey Broth 產品規格：250g 豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒現貨供應
改良麥康凱肉湯添加劑 英文名稱：Modified MacConkey Broth Additives 產品規格：1ml*5支 豬肺炎支原體抗體(MP-Ab)免疫試劑盒*直銷
月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯-MUG 英文名稱：LST-MUG 產品規格：1000ml 豬肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)免疫試劑盒進口、組裝
