細胞轉染：
1. LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞轉染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。
公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
名稱 | LNCaP clone FGC (人前列腺癌細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性，50歲 |
組織來源 | 前列腺；左鎖骨淋巴結癌轉移灶 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
背景描述 | 人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經確診為前列腺癌轉移。LNCaP clone FGC細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。LNCaP clone FGC細胞并不形成一致的單層，而是形成集落，在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。LNCaP clone FGC細胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。LNCaP clone FGC細胞生長極其緩慢，傳代后48小時內不應擾動。當培養瓶封包后，多數LNCaP clone FGC細胞從培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到后，在通常培養單層細胞的條件下培養24-48小時，以使細胞再貼壁。此后，可以換上新鮮培養液。如果需要，培養瓶內容物可以收集，300g離心15分鐘，以10毫升培養液重懸并培養到一個單獨的培養瓶中。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~32-36小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice. |
受體表達情況 | androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive |
基因表達情況 | human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen |
注意事項 | （1）這株細胞并不形成一致的單層，而是形成集落。傳代時如消化后細胞形成聚團，可以用滴管反復吹吸打碎。 （2）該細胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。生長很慢。傳代后 48 小時內不應擾動。需使用 Corning 的 cellbind 細胞培養瓶，貨號是 3289；或者使用多聚賴氨酸 包被過的培養皿。 （3）在細胞運輸途中，多數細胞會從培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到后，在通常培養單層細胞的條件下培養 24-48 小時，以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。 |
保藏機構 | ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211 |
細胞傳代：
1. 試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。
2. 棄掉培養皿中的培養基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養液重懸細胞，細胞計數后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養皿。
8. 將合適體積培養液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養皿中，使其均勻分布。
9. 將培養皿轉入 CO2培養箱中培養，第二天轉染。
細胞培養實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養細胞，同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用。
③使用培養液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養液應立即封閉瓶口，培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發現原有的細胞遺傳物發生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。
Ninein樣蛋白封閉多肽 | 雞減蛋綜合征病毒1976PCR檢測試劑盒 |
梅毒螺旋體(蒼白密螺旋體)PCR試劑盒 | 鱷失調蛋白ELISA試劑盒 |
人八聚體轉錄因子(OTF2A) ELISA試劑盒 | 動力蛋白激活蛋白3ELISA試劑盒 |
人白介su12受體亞基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)ELISA檢測試劑盒 | DEAD框肽5ELISA試劑盒 |
人A(VA)elisa試劑盒 | γELISA試劑盒 |
人程序性細胞死亡因子4(PDCD4)試劑盒ELISA | UV切除修復蛋白RAD23同源物AELISA試劑盒 |
UL16結合蛋白2封閉多肽 | 病毒H/H/H亞型(AIV-H/H/H)核suan檢測試劑盒 |
酪氨suan蛋白激mei受體B2封閉多肽 | 牛細小病毒PCR試劑盒 |
Cullin 4a蛋白封閉多肽 | 鯊魚源性成分（Shark）核suan檢測試劑盒 |
中心體蛋白27封閉多肽 | 耐PCR檢測試劑盒 |
C末端結合蛋白2封閉多肽 | 蜜蜂微孢子蟲通用PCR試劑盒 |
腫瘤壞死因子受體超家族成員19L封閉多肽 | LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞諾氏瘧原蟲PCR試劑盒 |
重組人CD3E蛋白 | 瘧原蟲通用PCR試劑盒 |
富含重復蛋白Q4封閉多肽 | 蜜蜂球囊菌PCR試劑盒 |
鉀離子通道多聚體結構域蛋白15封閉多肽 | 蜜蜂微孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 |
