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  • 核酸擴增檢測分析儀核酸提取儀溫度檢定系統

ZCPCRCAL 核酸擴增檢測分析儀核酸提取儀溫度檢定系統

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  • 型號ZCPCRCAL
  • 品牌其他品牌
  • 所在地合肥市
  • 更新時間2022-04-13
  • 廠商性質生產廠家
  • 所在地區合肥市
  • 實名認證已認證
  • 產品數量54
  • 人氣值8180
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智測電子,專業致力于計量校驗、傳感器檢測技術,研發生產計量校驗儀器設備、檢測儀器、傳感器等,為用戶提供計量、驗證、檢測解決方案。

公司產品:

如熱阻熱偶檢定系統、環境試驗設備校準系統、電工儀表檢定系統、滅菌驗證系統、純蒸汽質量測試系統、無線記錄儀、校準恒溫槽等廣泛應用于計量、質檢、科教、工業、生物醫藥等領域。


同時,公司是計量校準、工業測試儀器行業*美國FLUKE公司的核心經銷商,美國FLIR熱像儀公司*代理商。為用戶提供*的測試儀器及計量校準技術信息,助你與世界同步。

旗下機構:

合肥智測電子有限公司

上海智與懋檢測儀器設備有限公司





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產地國產 加工定制 適用領域醫藥
核酸擴增檢測分析儀核酸提取儀溫度檢定系統
系統配備高精度測溫儀1611A,采集速度可達10ms/通道2.鍍金工藝探頭,高貼合實驗孔,高精度測溫3.升級工藝軟排線,不易折損,體積更小4.支持定制探頭板,適用于便攜基因擴增儀、熒光檢測法檢測核酸濃度的全自動分析工作
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核酸擴增檢測分析儀核酸提取儀溫度檢定系統 產品詳情

核酸擴增檢測分析儀核酸提取儀溫度檢定系統

PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。或者使用熒光染料SYBRSYBR可以結合到雙鏈DNA上面,當體系中的模板被擴增時,SYBR可以有效結合到新合成的雙鏈上面,隨著PCR的進行,結合的SYBR染料越來越多,被儀器檢測到的熒光信號越來越強,從而達到定量的目的。

折疊編輯本段應用領域

臨床疾病診斷:各型肝炎、艾滋病、結核、性病等傳染病診斷和療效評價;地中海貧血、血友病、性別發育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優生優育檢測;腫瘤標志物及瘤基因檢測實現腫瘤病診斷;遺傳基因檢測實現遺傳病診斷。


食品安全:食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業阪崎腸桿菌等檢測。

科學研究:醫學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。

智測電子基因擴增儀溫度校準系統多通道PCR溫度計可被廣泛應用于PCR儀制造商,基因研究實驗室,生物研究所, 醫藥研發,計量所,第三方檢測機構,疾控中心,血液中心,出入境檢驗,刑事鑒定,司法鑒定,試劑生產商等行業


折疊編輯本段前景展望

實時熒光定量PCR的出現,極大地簡化了定量檢測的過程,而且真正實現了定量。多種檢測系統的出現,使實驗的選擇性更強。自動化操作提高了工作效率,反應快速、重復性好、靈敏度高、特異性強、結果清晰。隨著生物芯片技術和熒光探針定量技術的結合,熒光定量PCR在醫學檢測及其他各個領域中的應用前景將更加廣闊,令人欣喜。盡管如此我們也應清晰認識到,FQ-PCR技術在我國各個研究領域的應用并不多見,這就需要我國學者迎頭趕上,使FQ-PCR技術更充分地推廣,以推動研究工作的快速發展。

折疊編輯本段操作步驟

熒光定量PCR 實驗步驟:

折疊樣品RNA的抽提

取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚氯仿相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%

③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

折疊RNA質量檢測

1)紫外吸收法測定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

濃度測定

A260下讀值為1表示40 μg RNA/ml。樣品RNA濃度(μg/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 μg/ml。具體計算如下:

RNA溶于40 μl DEPC水中,取5ul1:100稀釋至495μlTE中,測得A260 = 0.21

RNA 濃度= 0.21 ×100 ×40 μg/ml = 840 μg/ml 0.84 μg/μl

5ul用來測量以后,剩余樣品RNA35 μl,剩余RNA總量為:

35 μl × 0.84 μg/μl = 29.4 μg

純度檢測

RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度,比值范圍1.82.1

2)變性瓊脂糖凝膠電泳測定

制膠

1g瓊脂糖溶于72ml水中,冷卻至60℃10 ml10× MOPS電泳緩沖液和18 ml37%

10×MOPS電泳緩沖液

濃度 成分

0.4M MOPSpH 7.0

0.1M 乙酸鈉

0.01M EDTA

灌制凝膠板,預留加樣孔至少可以加入25 μl溶液。膠凝后取下梳子,將凝膠板放入電泳槽內,加足量的1×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個毫米。

準備RNA樣品

3μgRNA,加3倍體積的甲醛上樣染液,加EB于甲醛上樣染液中至終濃度為10μg/ml。加熱至70℃孵育15分鐘使樣品變性。

電泳

上樣前凝膠須預電泳5min,隨后將樣品加入上樣孔。5–6V/cm電壓下2h,電泳至溴酚蘭指示劑進膠至少2–3cm

紫外透射光下觀察并拍照

28S18S核糖體RNA的帶非常亮而濃(其大小決定于用于抽提RNA的物種類型),上面一條帶的密度大約是下面一條帶的2倍。還有可能觀察到一個更小稍微擴散的帶,它由低分子量的RNA(tRNA5S核糖體RNA)組成。在18S28S核糖體帶之間可以看到一片彌散的EB染色物質,可能是由mRNA和其它異型RNA組成。RNA制備過程中如果出現DNA污染,將會在28S核糖體RNA帶的上面出現,即更高分子量的彌散遷移物質或者帶,RNA的降解表現為核糖體RNA帶的彌散。用數碼照相機拍下電泳結果。

探頭板支持客戶定制,滿足不同孔數需求

智測電子發布PCR基因擴增儀、基因分析工作站、核酸擴增檢測分析儀核酸提取儀溫度檢定系統



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