產(chǎn)品名稱 | 原代小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞 | 英文名稱 | Mouse Hypothalamic Neuron Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1436 |
組織來源 | 腦組織 | 細胞形態(tài) | 神經(jīng)元細胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)信息：包被條件PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：神經(jīng)元細胞樣
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.125%YI蛋白酶小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動和內(nèi)分泌活動的較高級神經(jīng)中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部(又名視前區(qū)和視上區(qū))﹑中部(結節(jié)區(qū))和后部(乳頭體區(qū))。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系，可以接受很多神經(jīng)沖動，為內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能，合成神經(jīng)垂體激素及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進行體外培養(yǎng)，建立下丘腦神經(jīng)元體外實驗平臺具有重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞采用YI蛋白酶消化法結合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細胞重新鋪瓶。
小鼠表皮干細胞 | 小鼠前脂肪細胞 |
小鼠脂肪微血管內(nèi)皮細胞 | 布魯氏桿屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠真皮毛乳頭細胞 | 水牛正痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠外根鞘細胞 | 羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠毛囊角質(zhì)細胞 | 牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞 | 洋蔥伯克氏探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠脂肪干細胞 | 鼻疽伯克霍爾德氏探針法熒光定量PCR試劑盒 |
雜交瘤細胞株；9-2 | 類鼻疽伯克霍爾德探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠毛囊干細胞 | 輪狀病毒（C組）PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠膈肌細胞 | 人鼻病毒PCR檢測試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠肌腱成纖維細胞 | 田鼠布魯氏探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠皮下微血管內(nèi)皮細胞 | 羊布魯氏探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠脂肪細胞 | 原代小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞流感病毒H7亞型PCR檢測試劑盒 （熒光PCR法） |
小鼠椎體終板軟骨細胞 | 流產(chǎn)布魯氏探針法熒光定量PCR試劑盒 |
登革熱病毒通用型(DFV-U)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 豬痢疾短螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉(zhuǎn)移至適當面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
