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鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒操作說明

時間:2019/12/6閱讀:286
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                      鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒操作說明

 

   十二月的家鄉,雪,開始洋洋灑灑地飄舞。地上的麥子同老人和孫子的目光一起瘋長。回歸的候鳥,捎來了老人的、孫子的父親回歸的消息。家鄉桃樹的芽孢,開始萌動。接下來介紹鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒操作說明。

以下原則:

 

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

 

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

 

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

 

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

 

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

 

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

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