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1. 拓撲異構酶
使DNA超螺旋結構解開，形成其基本的雙螺旋結構。
2. 解鏈酶
使DNA雙螺旋結構解開，堿基間氫鍵斷裂，形成兩條單鏈DNA，構成"復制叉“。
3. 單鏈DNA結合蛋白
單鏈DNA結合蛋白結合在兩條單鏈DNA上，穩定單鏈DNA，阻止DNA復性，避免被核酸酶降解，便于復制子代DNA 。
4. 引物酶
是一種依賴DNA的RNA聚合酶，該酶以DNA為模板，聚合一段RNA短鏈引物，以提供自由的3'-OH，形成引發體，使子代DNA鏈能夠開始聚合。
5. DNA聚合酶
由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚合子代DNA鏈，即模板DNA鏈的方向必須為3'→5'。因此，分別以兩條親代DNA鏈作為模板聚合子代DNA鏈時的方式是不同的。
以3'→5'方向的親代DNA鏈作模板的子鏈，在復制時連續合成，子鏈的聚合方向為5'→3'，這一條新合成的子鏈被稱為前導鏈(leading strand)。以5'→3'方向的親代DNA鏈為模板，合成子鏈的過程不連續，這條鏈被稱為隨從鏈(lagging strand)或滯后鏈。
DNA雙鏈在復制時逐步解開，因此隨從鏈的合成是一段一段的。DNA在復制時，由隨從鏈所形成的一些子代DNA短鏈稱為岡崎片段 (Okazaki fragment)。
6. DNA連接酶
在DNA連接酶的催化下，形成最后一個磷酸酯鍵，將岡崎片段連接起來，形成完整的DNA長鏈。
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