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206次測定大分子量物質的夾心法ELISA,標準曲線的范圍一般較寬,曲線高點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數紙,以檢測物的濃度為橫坐標,ELSIA試劑盒以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是理想的檢測。 VEGT-Delisa試劑盒而非特異IgM由于其在*步溫育中,可與特異IgM競爭與固相抗體結合,所以會影響測定的靈敏度。因此,使用本法測IgM,必須對臨床樣本進行適當稀釋。樣本稀釋后,上述產生干擾作用的非特異IgM含量減少,而特異IgM由于處于相應病原體的急染期,滴度很高,一定稀釋后,不會有明顯影響。
VEGT-Delisa試劑盒的分析
1.首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗體,洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗體后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結合的部分及雜質。
2.加入含待測IgM抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時間后洗板;此時,大鼠ELISA試劑盒待測樣本中的IgM抗體就會與固相上的抗P鏈抗體反應而吸附于固相上。
3.加入特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等,溫育一定時間后洗板;此時,特異抗原就會與固相上的特異IgM抗體發生反應。
4.加入酶標記的抗特異抗原的抗體,溫育一定時間后洗板;此時,在固相上即形成相應的抗原抗體復合物。
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