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股動脈平滑肌細胞

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 12:17:59瀏覽次數(shù):108次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研 貨號 FS-01X9783
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產品屬于:

產品名稱:股動脈平滑肌細胞    

產品規(guī)格:5×105

貨號:FS-01X9783

產品類型:原代細胞

單位:T25/瓶

提供細胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度(℃):37

運輸溫度(℃):常溫

 

   

98.jpg 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人抗巨細胞病毒抗體IgG(anti-CMV IgG)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒英文名稱:Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒英文名稱:Human soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人補體因子D(CFD)ELISA試劑盒英文名稱:Human complement factor D,CFD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Plasma fibronectin,pFN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cellular fibronectin,cFn ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒英文名稱:Human Total protein S,TPS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)ELISA試劑盒英文名稱:human serum deprivation response,SDPR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人中性粒細胞防御1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒英文名稱:Human neutrophil peptide 1-3,HNP1-3 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人嗜性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒英文名稱:Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人血漿抗凝蛋白S(PS) ELISA試劑盒 英文名稱:Human plasma anticoagulant protein S,PS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血漿抗凝蛋白C(PC) ELISA試劑盒 英文名稱:Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)B(CyPB)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cyclophilin B,CyPB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒英文名稱:Human coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒英文名稱:Human coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人補體1q(C1q)ELISA試劑盒英文名稱:Human Complement 1q,C1q ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒英文名稱:Human platelet membrane glycoprotein Ⅳ,GP-Ⅳ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
股動脈平滑肌細胞GAS2L1  生長停滯特異性蛋白2家族1抗體規(guī)格: 0.2ml

GAS2L3  生長停滯特異性蛋白2家族3抗體規(guī)格: 0.2ml

GilZ/TilZ  糖皮質誘導亮拉鏈蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

MIER2  中胚層誘導早期反應蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

IEX1/Differentiation dependent gene 2 protein  分化相關基因2蛋白/立即早期反應蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

IL-4I1  白細胞介4誘導蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

JMJD6  凋亡細胞清除受體抗體規(guī)格: 0.2ml

MAGED1  黑色瘤相關抗原D1抗體規(guī)格: 0.2ml


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