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非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒即通用非瘟國家批文試劑盒廠家試劑盒

閱讀:576      發布時間:2021-1-28
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FT-ZWSJ1非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒即通用非瘟國家批文試劑盒廠家試劑盒【品牌|生產廠家|公司|型號】

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 非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒

【產品名稱】

通用名稱:病毒*

英文名稱:Extraction Kit for Virus DNA

【預期用途】

本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環境中的病毒DNA的提取,純化的核酸可適用于各種常規操作及PCR試驗。

【試劑盒組分】

I、試劑盒組成及貯藏條件

名稱

20 T

50 T

1、吸附柱

20個

50個

2、收集管

20個

50個

3、裂解液

5 mL

11 mL

4、洗液I

13 mL

32 mL

5,洗液II

13 mL

32 mL

6.洗脫液

1.2 mL

3 mL

 

2、 保存條件及有效期:室溫下保存,有效期12個月.

3、 需自備材料:無水乙醇、1.5 mL無菌離心管、1.5 mL無菌離心管(長臂型)、生理鹽水、研缽、無菌

1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號筆等。

【操作步驟】

一、樣品制備

1、 血液樣品:抗凝血樣品置離心管中,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中,待凝固后,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上層血清,置于滅菌離心管中,編號待檢。

2、 組織樣品:采集脾臟、肝臟、淋巴結、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,加入1 mL生理鹽水混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心骨中,編號待檢。

3、 口腔液:進食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團吸引動物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。

4、 飼料:取適量研磨后的飼料(約0.2g),放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮,振蕩混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢.

5、 灰塵:用無菌棉簽蘸取適量環境表面上的灰塵,放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中,振蕩混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。

二、DNA的提取

1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮,分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次,室溫放置5分鐘(如果室內溫度較低時.需放置25C水浴溫育),再加入200uL無水乙醇,顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉/分鐘離心1分鐘處理,取上清液,以避免堵塞柱子;

2、 將液體轉入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm離心1分鐘:

3、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;

4、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm離心I分鐘;

5、 棄收集管液體,12000 rpm離心2分鐘,以*去除殘留洗液;

6、將吸附柱轉入新的無核酸酸1.5mLEP管(長臂型)中,向柱*滴加50 uL洗脫液,靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘,EP管中液體即為病毒DNA。

【注意事項】

1、 實驗前諾仔細閱讀本試劑盒說明書,嚴格按照操作步驟執行.在操作過程中對時間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結果。

2, 樣本應新鮮采集使用,或低溫運輸儲存;

3, 樣本具有潛在感染風險,核酸的提取應在核酸提取實驗室的生物安全柜中進行。

4、 核酸提取冇關耗材確保高溫滅菌,提取后核酸盡快進入下一步試驗或冷凍保存待用。

5, 試劑使用前應混合均勻,試劑具有一定腐蝕性,使用時請戴手套、做好防護。

6. 低溫下裂解液出現結晶數屬正常現象,可在60°C水浴加熱助溶后使用。

7、 實驗產生的廢棄物應及時收集,遠離PCR實驗室進行無害化處理。

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