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上海博研生物科技有限公司
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人*(cAMP)ELISA測定試劑盒操作步驟

時間:2016/10/11閱讀:746
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人*(cAMP)ELISA測定試劑盒操作步驟實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人*(cAMP)水平。用純化的人*(cAMP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入*(cAMP),再與HRP標(biāo)記的*(cAMP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的*(cAMP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人*(cAMP)活性濃度。
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中*(cAMP)的活性。

 

人*(cAMP)ELISA測定試劑盒操作步驟操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

200IU/L

5號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

100IU/L

4號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

50IU/L

3號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

25IU/L

2號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12.5IU/L

1號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

 

人*(cAMP)ELISA測定試劑盒操作步驟相關(guān)產(chǎn)品:

BYS10994B *(NA) ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human aldosterone,ALD Elisa試劑盒 96T48T
BYS10995B 前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human Noradrenaline,NA Elisa試劑盒 96T48T
BYS10996B 前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human Prostaglandin F,PG-F Elisa試劑盒 96T48T
BYS10997B 內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human Prostaglandin E1,PG-E1 Elisa試劑盒 96T48T
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BYS10999B 抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human TYMroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB Elisa試劑盒 96T48T
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BYS11001B 甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human tYMroid stimulating hormone receptor antidoby,TRAb Elisa試劑盒 96T48T
BYS11002B 甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human tYMroid stimulating immunoglobulin,TSI Elisa試劑盒 96T48T
BYS11003B 甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human ParatYMroid hormone,PTH Elisa試劑盒 96T48T
BYS11004B *脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX Elisa試劑盒 96T48T
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BYS11006B 促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human Ultrasensitivity TYMroxine,u-T4 Elisa試劑盒 96T48T
BYS11007B 多巴胺(DA)ELISA試劑盒,96T/48T產(chǎn)品介紹 human tYMroid-stimulating hormone receptor antibody,TSHR Elisa試劑盒 96T48T

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