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人ELISA試劑盒質量保證說明書

時間:2014-3-17閱讀:561
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人ELISA試劑盒質量保證是一個復雜的過程,許多重要的環節都影響到檢測的質量:

1.定性測定 

2.半定量測定 結果一般以滴度表示。 

3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行人ELISA試劑盒測定,繪制標準曲線,結果以量或單位表示。在人ELISA試劑盒量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。 

4.結果報告 

人ELISA試劑盒操作步驟:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法 

1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 

2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 

3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 

4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應 

6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在人ELISA試劑盒檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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