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小鼠白介素2可溶性受體α鏈elisa試劑盒標本的稀釋原則

時間:2015/1/26閱讀:307
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下面我們來介紹下ELISA試劑盒的標本稀釋原則:

*、標本的稀釋原則:首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了N"倍,標本的濃度應再乘以N"

第二、標準品的稀釋原則:每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100ng/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋100ng/ml,50ng/ml,25ng/ml,12.5ng/ml,6.25ng/ml,3.12ng/ml,1.56ng/ml. 樣品稀釋液直接作為標準濃度0ng/mL,臨用前15分鐘內配制。如配制50ng/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100ng/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

第三、*標記抗體的稀釋原則: 臨用前以*標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl*標記抗體加990μl*標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。

第四、辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。


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