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江蘇科特商貿有限公司
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染色體結構顯示與檢測

時間:2015/7/27閱讀:328
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1)染色體顯帶 
Q帶法 
1. 漂洗:取經過干熱預處理或已老化的染色體標本,置于pH6.0緩沖液中浸5~10分鐘。 
2. 染色:浸入pH6.0GMQD染液中5~10分鐘。 
3. 漂洗:浸入新鮮pH6.0緩沖液中漂洗兩次,每次5分鐘。 
4. 觀察:向標本染色體面滴1~2滴新鮮緩沖液,覆以蓋片(避免出氣泡),置熒光顯微鏡下觀察。 

G帶法 
*-Giemsa混合顯帶法 
1.預處理:取中期染色體標本,置60℃~60℃溫箱中2030分鐘,或在37℃溫箱隔夜,然后浸入0.025M磷酸緩沖液中,pH6.856℃溫浴10分鐘。 
2.消化和染色:用現配制的*-Giemsa混合液消化和染色1030分鐘,混合液按如下比例配制: 
0.025 M 磷酸緩沖液pH6.8 73.0 ml 
甲醇 27.0 ml 
Giemsa干粉 50.0 mg 
0.25%* 0.30.4 ml 
3.封片:染色后用自來水沖洗,入蒸餾水漂洗數次、晾干、二甲苯透明2~3分鐘,封入中性樹脂中。 

Giemsa顯帶法 
1.預處理:將標本置入60~80℃溫箱或烤箱中20~30分鐘,亦可在37℃溫箱過夜。 
2.*消化:用0.85%NaCl配制0.25%*溶液消化3~5分鐘。 
3.染色:取出標本片,先直立于吸水紙上除去多余*液后,隨即置入Giemsa染液中,染10分鐘。 
4.封片:自來水洗,蒸餾水漂洗,晾干,二甲苯透明2~3分鐘,封入中性樹膠中。 

2)姐妹染色單體分化染色 
BUdR摻入和制片程序 
1BUdR培養液制備:先制備好含BUdR的培養液(zui終濃度為3~10微克/毫升)。 
2BUdR摻入:如用傳代細胞,在末次傳代后,改換用含BUdR的培養液培養。如為人末梢血細胞,一開始就用含BUdR培養液培養(培養瓶放在特制黑色木盒、黑布中或黑紙包裹)37℃溫箱內培養。 
3.中止摻入與制片:待細胞經歷兩個細胞周期(人周圍血細胞培養4872小時)

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