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elisa試劑盒
生化試劑
血清
細(xì)胞
培養(yǎng)基
菌種保存和樣品運(yùn)輸培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基 臨床檢驗(yàn)培養(yǎng)基 歐洲藥典培養(yǎng)基(EP標(biāo)準(zhǔn)) 美國藥典培養(yǎng)基(USP標(biāo)準(zhǔn)) 2010版中國藥典培養(yǎng)基 化妝品檢驗(yàn)檢驗(yàn)培養(yǎng)基 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品檢驗(yàn)檢驗(yàn)培養(yǎng)基 商業(yè)無菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢驗(yàn)檢驗(yàn)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 植物組培 蠟樣芽孢桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌、嗜熱菌芽孢檢驗(yàn)培養(yǎng)基 酵母菌、霉菌、念珠菌、青霉、曲霉檢驗(yàn)培養(yǎng)基 *檢驗(yàn)檢驗(yàn)培養(yǎng)基 腸球菌、溶血性鏈球菌和糞鏈球菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、大腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 菌落總數(shù)檢測培養(yǎng)基 顯色培養(yǎng)基

綿羊白細(xì)胞介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

時(shí)間:2015-9-2閱讀:211
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本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          96T

6ng/L - 160ng/L

使用目的:

本試劑盒用于測定綿羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素6(IL-6)含量

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中綿羊白細(xì)胞介素6(IL-6)水平。用純化的綿羊白細(xì)胞介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素6(IL-6)再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中綿羊白細(xì)胞介素6(IL-6)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(320ng/L

0.5ml×1

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1個(gè)

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

160ng/L

5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

80ng/L

4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

40ng/L

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

20ng/L

2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10ng/L

1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3

8.洗滌:操作同5

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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