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人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒

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更新時(shí)間:2018-02-01 21:01:31瀏覽次數(shù):255次

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我公司經(jīng)營(yíng)的ELISA試劑盒主要是進(jìn)口原裝的試劑盒,種類(lèi)齊全,價(jià)格實(shí)惠,在我公司購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品,方可免費(fèi)實(shí)驗(yàn)代測(cè)。試劑盒主要是48人份96人份,關(guān)于試劑盒的其他信息可以來(lái)電索要說(shuō)明書(shū),或者在線咨詢銷(xiāo)售人員。

中文名稱:人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒操作程序:

① 加抗體包被 → 4℃過(guò)夜,洗滌三次、拋干

② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干

④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液

ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒顯色的重要性

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無(wú)色,而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷。

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。

TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺(tái)上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類(lèi)終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類(lèi)酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)(450nm)測(cè)讀吸光值。

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