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上海滬峰生物科技有限公司
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內標法的介紹

時間:2015/1/4閱讀:446
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內標法 internal standard method 是色譜分析中一種比較準確的定量方法,尤其在沒有標準物對照時,此方法更顯其*性。內標法是將一定重量的純物質作為內標物(參見內標物條)加到一定量的被分析樣品混合物中,然后對含有內標物的樣品進行色譜分析,分別測定內標物和待測組分的峰面積(或峰高)及相對校正因子,按下列公式和方法即可求出被測組分在樣品中的百分含量。

校正因子:

f= (As/ms)/(Ar/m)

其中As和Ar分別為內標物和對照品的峰面積或峰高,ms和mr分別為加入內標物和對照品的量。

再取各品種項下含有內標物的待測組分溶液進樣,記錄色譜圖,再根據含內標物的待測組分溶液色譜峰響應值,計算含量(mi):

mi=f×Ai/(As/ms)

其中 Ai和As分別為供試品和內標物的峰面積或峰高,ms為加入內標物的量。必要時,再根據稀釋倍數、取樣量和標示量折算成為標示量的百分含量,或根據稀釋倍數和取樣量折算成百分含量。

當配制校正因子測定用的對照溶液和含有內標物質的待測組分溶液使用同一份內標物質溶液時,則配制內標物質溶液不必精密稱(量)取。

采用內標法定量時,內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說,內標物應當是一個能得到純樣的已知化合物,這樣它能以準確、已知的量加到樣品中去,它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征,是被分析物質的一個同系物。當然,在色譜分析條件下,內標物必須能與樣品中各組分充分分離。需要指出的是,在少數情況下,分析人員可能比較關心化合物在一個復雜過程中所得到的回收率,此時,他可以使用一種在這種過程中很容易被*回收的化合物作內標,來測定感興趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所說的選擇原則。g

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