在加熱滅菌前，成分應(yīng)邊攪拌邊溶解于水中。高壓滅菌的時(shí)間取決于培養(yǎng)基中微生物的含量，容器的大小，每個(gè)容器中物質(zhì)的體積和滅菌鍋內(nèi)容器的空間。

    在制備時(shí)，由于污染的微生物的含量通常很低，所以影響高壓時(shí)間的主要變量取決于上述其他的幾個(gè)因素。滅菌時(shí)間通常要在121℃下保持15~20min，這個(gè)時(shí)間從中心溫度達(dá)到121℃開始計(jì)算。可以將熱電偶放人滅菌鍋內(nèi)部中心進(jìn)行測(cè)定。

    lOOmL的瓶子或燒杯單獨(dú)放在髙壓鍋中達(dá)到121℃大約需要10min，如果多個(gè)瓶子緊挨著放滿滅菌鍋內(nèi)的絲懸筐中，瓶子中的物質(zhì)需要 20min才能達(dá)到121℃如果培養(yǎng)基或稀釋液的體積很大時(shí)，則需要更長(zhǎng)的時(shí)間；例如單獨(dú)使用1L的瓶子溫度達(dá)到121℃時(shí)需要20min,如果許多這樣的瓶子緊挨著放滿滅菌鍋內(nèi)的絲懸筐中，則中心溫度要達(dá)到121℃需要30mm或更長(zhǎng)的時(shí)間。為了達(dá)到滅菌的目的，它和稀釋液進(jìn)行高壓滅菌時(shí)，惟一正確的方法是將熱電偶放入滅菌鍋中測(cè)定。

    分裝在大的容器中時(shí)，可能會(huì)因?yàn)檠娱L(zhǎng)滅菌加熱時(shí)間而造成 熱降解。因此在高壓滅菌前，先將培養(yǎng)基成分溶解后分裝到較小的容器中。

    由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。一些需嚴(yán)格滅菌的需要較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在2~6℃的冰箱內(nèi)。

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