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ELISA實驗方法操作標準,加血清樣本及反應試劑

時間:2015/9/10閱讀:595
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    ELISA實驗方法操作標準,用于ELISA測定的標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。

在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:

1.要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。

2.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染。

3.血清標本如是以無菌操作分離,則可以在28下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70以下。

4.冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。

ELISA實驗方法操作標準,加血清樣本及反應試劑:

在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是*的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

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