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ELISA試劑盒研究干細胞生物學的性狀

時間:2016/11/30閱讀:236
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ELISA試劑盒的培養已經廣泛應用于產前遺傳學診斷,但其生物學性狀和在體內的起源仍沒有*明確。羊水中包含了多種異質細胞群,這些細胞主要來源于胎兒的皮膚,胎兒的消化器官、呼吸器官和尿道,以及羊膜上皮。間充質干細胞( MSCs) 是干細胞家族的重要成員,來源于發育早期的中胚層和外胚層。MSCs zui初在骨髓中發現,因其具有多向分化潛能、造血支持和促進干細胞植入、免疫調控和自我復制等特點而日益受到人們的關注。
ELISA試劑盒均有成功分離羊水來源干細胞的報導,大多是利用羊水細胞貼壁的特點通過多次傳代的方法獲得干細胞。Tsai MS 等采用兩步培養法從孕中期羊水中成功分離出具有MSCs 特征的干細胞。隨后De Coppi 等通過免疫磁珠方法分離出c - Kit ( CD117) 陽性細胞,這些細胞在體外增殖迅速,可以形成穩定的細胞系,他將這些細胞命名為羊水干細胞。此外通過克隆化培養的方法也可以從羊水中獲得干細胞。從現有研究情況看來,目前尚未形成統一的羊水干細胞培養體系。
ELISA試劑盒采用貼壁法分離獲得羊水細胞,培養細胞使用低糖DMEM 培養基。收集的20 例羊水標本中有17 例原代培養成功,并獲得可以持續傳代的穩定細胞系。培養的羊水細胞體外增長迅速,倍增時間約36h。流式細胞儀檢測顯示細胞表達CD29、CD44、CD105 等間充質干細胞表面標志,不表達造血干細胞表面標志CD45 和CD133。RT - PCR 的結果表明分離獲得的干細胞表達Oct - 4 和Nanog 基因,且不同代的細胞間均有表達。Oct - 4 和Nanog 被認為是干細胞多能分化的主要調節因子,干細胞分化后其表達立即下調。以上結果與文獻報道一致,表明羊水細胞經體外培養擴增可以得到具有MSCs 性質的干細胞。

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