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ELISA試劑盒標準曲線樣品檢測時需要注意

時間:2017/8/21閱讀:350
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ELISA試劑盒標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意:
一、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
二、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度。三、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
四、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
五、標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。
六、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。
 

ELISA試劑盒血清滅活處理步驟:
① 選用與血清瓶同規格的對照瓶一個。
② 對照瓶內放入與血清等體積的水。
③ 溫度預試:對照瓶內插入2—3支經挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調節溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
④ 血清滅活:血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時, 定時30分鐘。
⑤ 大瓶血清滅活后,進行分裝。
⑥ 保存。

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