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實(shí)驗(yàn)ELISA試劑盒加樣步驟要避免氣泡產(chǎn)生

時(shí)間:2017/10/13閱讀:506
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許多說(shuō)明書(shū)、教科書(shū)上都提到,加樣時(shí)要防止呈現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢?由于在做實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,有時(shí)為了打潔凈槍頭里面的液體,ELISA試劑盒很簡(jiǎn)單發(fā)生氣泡,是不是這樣對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)后什么影響?
1.一般氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周?chē)瑢?dǎo)致孔中液體不能與孔壁有用觸摸,使孔內(nèi)反響不均一。
3.包被時(shí)有氣泡的話(huà),將導(dǎo)致包被不*實(shí)踐包被量下降--弱陽(yáng)性乃至假陰性。
4.關(guān)閉時(shí)有氣泡的話(huà),將導(dǎo)致很多未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽(yáng)性。
5.加樣時(shí)有氣泡的話(huà),抗原抗體不能有用的結(jié)合--弱陽(yáng)性乃至假陰性。
6.加二抗時(shí)有氣泡的話(huà),抗原抗體不能有用的結(jié)合--弱陽(yáng)性乃至假陰性(競(jìng)爭(zhēng)法相反----假陽(yáng)性)。
7.加顯色液時(shí)有氣泡的話(huà)---顯色不*。
8.加停止液時(shí)有氣泡的話(huà)(1、不能*停止反響 2、影響酶標(biāo)儀比色,OD值增高)
9.洗刷時(shí)有氣泡的話(huà),ELISA試劑盒非特異性結(jié)合物不能*洗去,做無(wú)用功。
 防止辦法:
1、加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要觸摸孔底),用力均勻,不要過(guò)快過(guò)猛。
2、關(guān)閉時(shí)一定要加滿(mǎn)孔,
3、洗刷時(shí)一定要加滿(mǎn)孔(重要),氣泡會(huì)浮上來(lái)終究驅(qū)除。手藝洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。
 

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