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酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(抗體)的基本原理

時(shí)間:2017/11/10閱讀:239
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1971年Engvall和Perlmann宣布了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定辦法。這一辦法的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體外表,并堅(jiān)持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保存其免疫活性,又保存酶的活性。在測(cè)守時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其間的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的過(guò)程與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗滌的辦法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。參加酶反響的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)品,產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反響的深淺刊物定性或定量分析。因?yàn)槊傅拇呋l率很高,故可極大地地?cái)U(kuò)大反響作用,從而使測(cè)定辦法到達(dá)很高的敏感度。

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