當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒使用中作用的評估
ELISA試劑盒因?yàn)閮艋M(jìn)程中引入的溶劑,可能會(huì)下降待測組分的濃度或許不適宜直接剖析,需求去除悉數(shù)有機(jī)溶劑。即前處理進(jìn)程中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈桑儆脧?fù)溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮方法:氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。
留意:
1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)攪擾。
2在吹樣本時(shí),針頭應(yīng)在液面上空,防止與樣本觸摸,防止發(fā)生穿插污染。
3樣本吹干后應(yīng)當(dāng)即取下,防止吹的時(shí)刻過長,影響終究檢測成果。
4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)
期不同,提倡待樣本回到室溫后當(dāng)即復(fù)溶。
5凈化
通過提取的待測組分中一般含有一些會(huì)攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或許是含有與待測物結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的進(jìn)程,我們稱為ELISA試劑盒中樣本的凈化。
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反響孔中加0.1ml4℃過一夜。次日,ELISA試劑盒棄去孔內(nèi)溶液,用洗刷緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗刷,下同)。
2.加樣:加必定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗刷。(一起做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.加酶標(biāo)抗體:于各反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),ELISA試劑盒洗刷。
4.ELISA試劑盒加底物液顯色:于各反響孔中參加暫時(shí)制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
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