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如何正確處理實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌菌種

時(shí)間:2018/1/11閱讀:262
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在微生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)、分子生物學(xué)、酶學(xué)、疫苗制備、藥品生產(chǎn)等等領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,都需要應(yīng)用各種細(xì)菌,儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)菌種、參考菌種、特殊菌種是*的,下面就幾種實(shí)驗(yàn)室菌株的保存方法簡(jiǎn)述如下。
1 斜面低溫保存法

將分純的待存菌接種于適宜的固體斜面培養(yǎng)基上,得到充分生長(zhǎng)后,用封口膜封口,貼上標(biāo)簽,保存于4℃的冰箱中。此法操作簡(jiǎn)單、使用方便、不需要特殊設(shè)備,是實(shí)驗(yàn)室菌種保存zui常用的方法。但保存時(shí)間短,一般每個(gè)月都要移種1次,而且菌種容易變異,所以此方法只適合實(shí)驗(yàn)室短期實(shí)驗(yàn)菌株的保存。

2 半固體瓊脂法

用接種針將以分純的待存菌,穿刺接種于半固體中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出,封上無(wú)菌的液體石蠟,貼上標(biāo)簽,放4℃冰箱保存。此方法簡(jiǎn)便易操作,不需特殊設(shè)備、技術(shù)難度不大,但保存的時(shí)間不長(zhǎng),一般只能保存1年以內(nèi),而且對(duì)抵抗力弱以及一些特殊菌種大概只能存活3~6個(gè)月,需要頻繁的傳代,這樣很容易使菌株受到污染、變異。所以此方法不適用菌種的長(zhǎng)期保存,只適合實(shí)驗(yàn)室一些要求不高的菌種的短期保存。

3 液體石蠟保存法

將液體石蠟滅菌,放于37℃恒溫箱中,使水汽蒸發(fā)掉備用。再將已分純的待存菌在zui適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng),使得到健壯的菌體,用無(wú)菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟,注入已長(zhǎng)好的斜面培養(yǎng)基上,用量以高出斜面1cm為準(zhǔn),將試管直立,貼上標(biāo)簽,置4℃下保存。此法制作簡(jiǎn)單,不需要特殊設(shè)備,菌種可以保存1年左右不需要經(jīng)常移種,缺點(diǎn)是保存的時(shí)候需要直立放置。此方法適合實(shí)驗(yàn)室短期菌株的保存,而且保存時(shí)需要一定的空間[1]。

4 高層半固體瓊脂石蠟保存法

將待存菌經(jīng)平板劃線分離后,挑單個(gè)菌落用接種針?lè)磸?fù)穿刺接種到高層半固體瓊脂培養(yǎng)基中,經(jīng)培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出,用滅菌過(guò)的液體石蠟滴加到半固體瓊脂菌種管表層約0.5cm高度,貼上標(biāo)簽,存放4℃冰箱。此法操作簡(jiǎn)便,不需要特殊設(shè)備,效果好,可以保存菌株1~2年。所以適合實(shí)驗(yàn)室菌株的較長(zhǎng)期的保存[2]。

5 紙片法

將已分純的待存菌用無(wú)菌鑷子鑷取紙片,在紙片上刮取4~5個(gè)菌落,放入凍存管內(nèi),蓋上蓋子后用封口膠布封住邊緣,貼上標(biāo)簽,放入冰箱冷凍保存(-20℃左右)。此方法具有操作簡(jiǎn)單、不需特殊設(shè)備、經(jīng)濟(jì)實(shí)用、保存空間小等,而且保存時(shí)間至少2年,但對(duì)一些營(yíng)養(yǎng)要求比較高的菌種,存活率不理想。所以此方法適合實(shí)驗(yàn)室一些營(yíng)養(yǎng)要求不高的菌種較長(zhǎng)時(shí)間的保存[3]。

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