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ELISA試劑盒實驗冷凍切片環(huán)節(jié)的注意事項

時間:2018/2/26閱讀:264
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ELISA試劑盒試驗冷凍切片的染色
切好的冷凍切片當即投入丙酮中進行固定,一般固定1~2 min即可進行染色,用于免疫組化染色的冷凍切片應(yīng)在切片略干時馬上投入冷甲醇中固定10~15 rmin然后進行相應(yīng)的組織化學染色程序。
1.冷凍切片的HE染色程序。
切片在丙酮中固定1~2 min。
水洗5 s。
在0.5%的鹽酸乙醇液中分化1~3 s。
水洗5 s。
甲苯I、二甲苯Ⅱ通明各5 s。
運用新鮮的Harris蘇木精染液染細胞核2min。
水洗5 s。
干組織周圍的二甲苯,在二甲苯?jīng)]有單調(diào)前滴加光學樹脂膠封片。
在0.5%~1%的伊紅染液中染細胞質(zhì)20~30 s。
水洗5 s。
在95%乙醇I、95%乙醇Ⅱ、100%乙醇I、ELISA試劑盒100%乙醇Ⅱ、中逐級脫水各3~5 s。
ELISA試劑盒試驗冷凍切片的制造辦法
運用氯乙烷噴灑、二氧化碳噴射、半導(dǎo)體制冷的辦法均可制造一般的冷凍切片,用于術(shù)中的病理確診。恒冷箱冷凍切片機能夠制造適用于各種目地的冷凍切片,是現(xiàn)在zui為常用的志向冷凍切片制片辦法。
標本冷凍完成后將標本托固定在切片機的機頭上,調(diào)整機頭方位使其剛好坐落切片刀的后方。
將恒冷箱冷凍切片機的速凍頭和箱內(nèi)溫度調(diào)整到合適的切溫度,一般情況下為一18~一25℃。
運用粗切削辦法進行標本的粗切削至顯露標本的zui大平面,ELISA試劑盒運用自動推進辦法接連切削2~3刀后用毛筆鏟除機頭、標本托及切片刀上的組織碎屑。
以自動推進的辦法進行切片,出色的切片將在防卷板的下方構(gòu)成一張無缺平整的薄片,如切片略有彎曲可用小毛筆悄然展平切片。
在標本冷凍托上涂布一層*一OCT,然后將選材后新鮮標本安放在標本冷凍托上并用OCT掩蓋標本。
翻開防卷板,用載玻片平穩(wěn)地輕壓切片使其平整地吸附到載玻片上。
調(diào)整并供認切片的厚度,一般為4~8 um,染脂肪和神經(jīng)組織應(yīng)控制在12~25 um。
ELISA試劑盒試驗放下防卷板使防卷板的方位剛好與切片刀的刀刃*平行并略突出于刀刃。

 

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