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鑒別ELISA試劑盒真?zhèn)蔚姆椒?/h1>
時(shí)間:2018/3/26閱讀:266
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鑒別ELISA試劑盒真?zhèn)蔚姆椒ǎ?/p>

一.利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:

(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體

(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物

(4) 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

二. 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:

(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。

(5) 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條
標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

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