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ELISA試劑盒免疫檢測方法

時間:2016-10-19閱讀:255
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   因此在ELISA試劑盒測定的反應過程中應盡量避免非特異性吸附,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。在標本和結合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯(吐溫,Tween)一類物質即右達到此目的。

●檢驗項目的基本原理 (ELISA試劑盒原理)根據檢測目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體(原)夾心法 檢測抗原(體)的常見方法,應用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固ELISA試劑盒相載體和酶標抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價以上抗原,不能測 小分子半抗原)。
●間接法 檢測抗體的方法,利用酶標記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結合的抗體。
●競爭法 檢測抗原或小分子半抗原、抗體,以測抗原為例,使待測抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,結果如待測抗原含量越多,與固相抗體結合的酶標抗原就越少,顯色越淺,二者呈負相關。

   ELISA試劑盒過程中不是反應聚,但卻是決定實驗成敗的關鍵。洗滌的目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯待塑料對蛋白質的吸附作用是普遍性的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水*脂肪酸酯,為非離子型的表面張力物質,常作為助溶劑。根據脂肪酸的種類而對聚山梨酯編號,結合月桂酸的為聚山梨酯20,在ELISA中zui為常用。它的洗滌效果好,并具有減少非特異性吸附和增強抗原抗體結合的作用。

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