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其受體及細(xì)胞因子的生物學(xué)測(cè)定法

時(shí)間:2016-12-27閱讀:218
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許多細(xì)胞因子對(duì)于轉(zhuǎn)化的細(xì)胞及病毒感染的細(xì)胞具有溶細(xì)胞或按捺細(xì)胞成長(zhǎng)的活性。常用的檢查細(xì)胞增殖的辦法有3H-TdR摻人法、比色法、染色法和直接計(jì)數(shù)法等。檢查細(xì)胞因子促成長(zhǎng)活性或按捺成長(zhǎng)活性是將不一樣稀釋度的待測(cè)樣品或細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品與培育的細(xì)胞株一起培育必定時(shí)刻,然后檢查增殖的細(xì)胞數(shù)。此外,測(cè)定代謝產(chǎn)品熒光強(qiáng)度的辦法也可檢查增殖細(xì)胞數(shù),如ATP法和cAMP法。檢查細(xì)胞因子溶細(xì)胞八田胞毒活性或按捺成長(zhǎng)活性是將不一樣稀釋度的待測(cè)樣品或細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品與培育的細(xì)胞株一起培育必定時(shí)刻,然后檢查存活的靶細(xì)胞數(shù),并與對(duì)照比較求得溶細(xì)胞或按捺細(xì)胞成長(zhǎng)的百分率,或以O(shè)D值對(duì)樣品稀釋度作圖,制作標(biāo)準(zhǔn)品的劑量反響曲線,從曲線上求得相應(yīng)的待測(cè)樣品的含量。生物學(xué)活性檢查法所用的靶細(xì)胞可直接從安排中分離,如骨髓細(xì)胞的集落形成實(shí)驗(yàn)和胸腺細(xì)胞(脾細(xì)胞)的增殖實(shí)驗(yàn),或用體外培育的依靠細(xì)胞因子才干成長(zhǎng)的細(xì)胞因子依靠株及對(duì)細(xì)胞因子殺傷靈敏的細(xì)胞作為靶細(xì)胞。細(xì)胞因子還能誘導(dǎo)靶細(xì)胞表達(dá)某些外表分子或排泄一些蛋白質(zhì),可以用熒光素標(biāo)記抗體檢查表達(dá)相應(yīng)分子的細(xì)胞數(shù),或用特定辦法測(cè)定細(xì)胞排泄的蛋白質(zhì),直接了解細(xì)胞因子的活性。

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