ELISA試劑盒因為酶聯免疫吸附技術現在在技術上短少標準化，盡管現在上以及我國有了部分標準血清或參比血清（血清盤）。因而，血標本在收集處理時應當心，在冰箱中保存不易過久。在酶聯免疫測定尤其是直接ELISA試劑盒中，試劑的特異性取決于。標本凝集不全時，血清中會殘留部分纖維蛋白原，也易構成假陽性。檢修標本中含有酶符號物的煩擾物，內源性煩擾物類風濕因子（RF）、黃疸等，類風濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體，大都為IgM類，能充當抗原成分與固相及酶標抗體反應，然后呈現非特異性顯色。
ELISA試劑盒如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP（辣根過氧化酶），有國內報導酶免HBsAgELISA試劑盒測溶血標本時可構成假陽性。ELISA試劑盒中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見。外源性煩擾物，經常因樣品收集、貯存、處理不當構成如樣品溶血，被細菌污染，標本凝集不全等。
ELISA試劑盒如在冰箱中保存過久，其間的IgG可發作聚合，在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因為受方法學及技術條件的約束，在酶聯吸附測定中有時不可避免的會泛起必定的非特異性，但我們可以通過以上方法把非特異性顯色降至zui低限底，然后行進檢測的特異性，并得到更正確、牢靠的試驗結果。