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ELISA試劑盒剖析蛋白質定量的新方法

時間:2017-12-27閱讀:241
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ELISA試劑盒生物學研討離不開定量。關于必定定量,一般需求運用已知濃度的分子制造標準曲線。近來,研討人員介紹了一種新方法,能運用串聯質譜儀對多個蛋白質進行必定定量。
在MARQUIS方法中,關于每個待定量的肽段,研討人員樹立重同位素符號的肽段。他們以不一樣的量混合這些肽段,并在組織或細胞裂解后立即將一種混合物參與每個生物樣品中。研討小組的負責人認為:“這是要害的一步。你要盡早參與這些肽段,這么重同位素符號肽段和內源肽段的丟掉可一同發作。
ELISA試劑盒隨后以同位素試劑符號樣品,并參與質譜儀中。每個肽段發作兩個峰:“重”峰代表組成的(加標)肽段,而“輕”峰代表內源性蛋白。經過定量前者碎片化所發作的符號離子,研討人員能發作每個肽段的標準曲線。今后他們能測定對應內源性肽段的信號,判定樣品中存在多少分子。
研討小組運用MARQUIS定量了EGFR信號通路中的*磷酸化。在幾種配體影響今后,他們在多個時間點定量了EGFR網絡內的磷酸化動力學,完結了EGFR磷酸化位點的定量對比,并證明了關于每種配體,受體磷酸化在性質上相似,但數量上不一樣。他們還培養了膠質母細胞瘤異種移植物,并運用這種方法定量了EGFR激酶克制的作用。
ELISA試劑盒據介紹,MARQUIS能一同定量10個樣品中多達100種肽段。這只需求一臺串聯質譜儀(如三重四級桿)、市售的同位素符號試劑,以及重同位素符號的組成肽段。每個人都能完結。咱們希望創建出一種恰當簡略的方法,而不需求什么訣竅。

 

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