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elisa分析檢測試劑盒有哪些操作步驟

時間:2018/10/25閱讀:311
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   ELISA試劑盒是免疫診斷中的一項新技術,也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。

  elisa分析檢測試劑盒操作步驟

 1.首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗體,洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗體后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結合的部分及雜質。

2.加入含待測IgM抗體的臨床樣本如血清等,溫育一定時間后洗板;此時,大鼠ELISA試劑盒待測樣本中的IgM抗體就會與固相上的抗P鏈抗體反應而吸附于固相上。
3.加入特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等,溫育一定時間后洗板;此時,特異抗原就會與固相上的特異IgM抗體發生反應。
4.加入酶標記的抗特異抗原的抗體,溫育一定時間后洗板;此時,在固相上即形成相應的抗原抗體復合物。
     因此,如不對血清樣本稀釋,就直接檢測,即使是沒有非特異IgM的干擾,陽性測定結果也沒有急染的診斷價值。現在,有些試劑生產廠家,為了迎合臨床實驗室減輕勞動強度、大鼠ELISA試劑盒簡便操作的要求,生產了不需對樣本進行稀釋的抗HAVIgM和抗HBclgMELISA試劑盒,現有不少實驗室也在使用。鑒于上面提到的原因,我們建議臨床實驗室在做抗HAVIgM和抗HBc lgM等類檢測時,應使用對樣本進行稀釋的試劑盒,以保證檢測的臨床價值。

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