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進口原裝elisa試劑盒分析細胞活力鑒定

時間:2017-8-30閱讀:156
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進口原裝elisa試劑盒原理: 

    細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與解體的DNA 結合,使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內。故可以鑒別死細胞與活細胞。  

    用品: 

    1. 4%臺盼藍母液:稱取4g臺盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4度保存。使用時。用PBS稀釋至0.4%。 2. 吸管、血細胞計數板、顯微鏡  

    步驟: 

    1、制備單細胞懸液。并作適當稀釋(106 細胞/ml) 2、染色:細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合混勻。 3、計數:在三分鐘內,用計數板分別計數活細胞和死細胞  

    結果統計: 

    鏡下觀察,死細胞被染成淡藍色,而活細胞拒染。 根據下式求細胞活力: 

    活細胞率(%)= 活細胞總數/(活細胞總數+死細胞總數)×100  

    注意事項:臺盼藍染細胞時,時間不宜過長。否則,部分活細胞也會著色,會干擾計數。

    臺盼藍染色原理 

    通常認為細胞膜喪失完整性,細胞即可被認為已經死亡。臺盼藍(Trypan Blue)是檢測細胞膜完整性常用的生物染色試劑。健康的正常細胞能夠排斥臺盼藍,而死亡的細胞,膜的完整性喪失,通透性增加,細胞可被臺盼藍染成藍色。依據此原理,細胞經臺盼藍染色后,可通過顯微鏡,直接鏡下計數或拍照后計數,實現對細胞存活率比較的定量分析。 

    進口原裝elisa試劑盒試述臺盼藍染發鑒別死活細胞的原理,試分析染色時間過長本來是活細胞也被染色的原因  

    死細胞的細胞膜無屏障作用,臺盼藍馬上進入細胞而顯藍色。活細胞細胞膜有選擇透性,對臺盼藍的透性小,進入細胞慢。若染色時間過長,臺盼藍可能通過胞吞或胞飲作用進入細胞。 
RIPA組織/細胞快速裂解液    N/A    20ml    0
RIPA組織/細胞裂解液    N/A    100ml    0
Mueller-Hinton Agar mha MBA    N/A    250g    0
Mueller-Hinton Broth 肉湯 MHB    N/A    250g    0
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)    N/A    500g    0
BSA﹠PBS緩沖液(干粉)    N/A    1L    0
SSC緩沖液(干粉)    N/A    500G    0
進口原裝elisa試劑盒

 

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