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elisa定量檢測試劑盒顯色比空缺還低

時間:2017-11-15閱讀:101
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 elisa定量檢測試劑盒檢測系統可謂是免疫學反應應用到科研出產中為廣泛為敏捷的技術手段。自己也為此苦惱過很長一段時間,跟著自己技術水平得進步,或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現在做方陣,做ELISA已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下戰書還算得暈暈的,現在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定。可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA時就面對良多災題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色。
①抗原包被:兔抗人IgG 作為抗原,用包被液l:8000稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。
②洗滌:次日傾去凹孔內的液體,洗滌液洗3次。
③封閉:加l00μL/孔封閉液,室溫放置0.5h.
④洗滌:用洗滌液洗3次。
⑤加待測樣品(一抗):將含單克降抗體的細胞培養上清在另-塊板上用PBS 連續稀釋(按照1:2或1:10),100μL /孔加到 已包被的板上,elisa定量檢測試劑盒每個樣品平行做兩份,PBS或空白培養基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌:用洗滌液洗3次。
靛基質試驗    Tryptone Broth    胰蛋白胨水肉湯    250克
蛋與蛋制品中沙門氏菌檢驗    Brilltant Green Enrichment Broth    亮綠增菌液    250克
蛋白組級    Nonfat-Dried Milk    無脂肪奶粉    250克
單增李氏菌選擇性分離    Modified Mcbride Agar Base    改良McBride瓊脂培養基    250克
單增李氏菌的選擇性分離    PALCAM Agar    PALCAM瓊脂    250克
單增李氏菌的選擇性分離    Oxford Agar Base    OXA基礎    250克
單增李氏菌的選擇性分離    LPM Agar    李氏LPM瓊脂    250克
大腸菌群及大腸桿菌分離    MacC Agar Plate    麥康凱瓊脂平板    50塊
大腸菌群的平板測定以及腸道菌的選擇性培養    DCLA    脫氧膽酸鈉瓊脂    250克
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