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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞:Sf9

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-06 15:20:16瀏覽次數(shù):224次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01X0204
昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞:Sf9 公司正在出售的產(chǎn)品:1mg 重組蛋白A Recombinant Protein A -20℃保存2 ug pTRE2 pTRE2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存50次 柱式拭子DNAout Column Swab DNAOUT 常溫2 ug pECFP- N1 pECFP- N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存改良Y培養(yǎng)基 Agar Y,Modified 250g

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞:Sf9 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細(xì)胞系

貨號(hào)

GOY-01X0204

商品介紹:

名稱 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞:Sf9 

別稱SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9

種屬草地貪夜蛾

年齡(性別)蛹

組織來(lái)源卵巢

生長(zhǎng)特性半貼半懸

細(xì)胞形態(tài)圓形

背景描述Sf9細(xì)胞是源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,可以用于復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基TNM-FH10% FBS1% P/S

推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~27-50小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,100%

溫度:28℃

注意事項(xiàng)該細(xì)胞為28℃培養(yǎng),不通二氧化碳,請(qǐng)?zhí)崆皽?zhǔn)備專用培養(yǎng)箱。

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

CXCL12 / SDF1b 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

EBI3 / IL27b 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

EBI3 / IL27b 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

ZAP 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

CD146 / MCAM 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

CD146 / MCAM 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

VHR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞:Sf9 CDKN3  細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

2 ug pCMV6 entry pCMV6 entry 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

2mL RNA Loading Buffer,6X RNA Loading Buffer,6X 常溫保存

10mL TE緩沖液,PH7.0  

1瓶 QG-56細(xì)胞株 QG-56 低溫運(yùn)輸和保存

50T 小麥PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1 管 Rosetta-gamiB(DE3)plysS大腸桿菌 Rosetta-gami B(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存

2 ug pGAPZ B pGAPZ B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

7.5%氯化鈉肉湯 7.5% Sodium Chloride Broth 250g

100mL HEPPS Buffer,0.2M,pH8.0  HEPPS Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

CA XI/Carbonic Anhydrase XI  碳酸酐11抗體 規(guī)格: 0.2ml

2216E瓊脂 2216E Agar 250g

 


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