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兔椎間盤纖維環細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 13:05:42瀏覽次數:145次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0812
兔椎間盤纖維環細胞公司正在出售的產品:100mL Sodium Fluoride Solution(氟化鈉溶液),200mM Sodium Fluoride Solution,200mM 常溫保存1 管 Y1090大腸桿菌 Y1089 E.coli Strain -80℃保存2 ug pShooter pShooter 低溫運輸,-20℃保存250次 細菌RNAout Bacterial RNAO

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

兔椎間盤纖維環細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0812

商品介紹:

名稱 兔椎間盤纖維環細胞

2.組織來源:椎間盤組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

兔椎間盤纖維環細胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現,它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少,纖維環的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。

5.方法簡介:

()實驗室分離的兔椎間盤纖維環細胞采用膠原酶-中性聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的兔椎間盤纖維環細胞型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-Rb032

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3%NaCl胰胨水  20支 0.312-20 ng/mL 人αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA試劑盒

2 ug pcDNA3.1/GS pcDNA3.1/GS 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人隱藏家族蛋白1(CFC1)ELISA試劑盒

高鹽察氏瓊脂 Salt Czapek Dox Agar 250g 15.6-1000 pg/mL 人整合素β1,ITG β1 ELISA試劑盒

5g α- 酮戊二酸鈉 α-Ketoglutaric Acid Disodium Salt Anh

兔椎間盤纖維環細胞E. coli LPS  大腸桿菌脂多糖抗體 規格: 0.2ml

100 mg Calcein M  Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

2 ug pOPRSVI/MCS pOPRSVI/MCS 低溫運輸,-20℃保存

2 ug pDG1363 pDG1363 低溫運輸,-20℃保存

SAMD9  SAMD9蛋白抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-Avidin/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗親和素 規格: 0.1ml

Collagen III  抗Ⅲ型膠原抗體 Collagen Ⅲ 規格: 0.1ml

PRKCDBP  蛋白激C delta結合蛋白抗體 規格: 0.2ml

phospho-SHC (Tyr427)  磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體 規格: 0.1ml

polyprotein[Classical swine fever virus, CSFV]  抗豬繁與呼吸綜合征/豬藍耳毒抗體 0.2ml

GRK2/BARK1/ADRBK1  G蛋白偶合受體激2抗體 規格: 0.1mlE3 ubiquitin ligase/RNF218  E3泛素連接抗體 規格: 0.2ml

MTCP1  成熟T淋巴細胞增蛋白1抗體 規格: 0.2ml

phospho-c-Raf(Tyr341)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規格: 0.1ml

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