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單核細胞白血?。篢HP-1

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-06 15:50:54瀏覽次數:175次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0232
單核細胞白血?。篢HP-1 公司正在出售的產品:1瓶 HUVEC細胞株 HUVEC 低溫運輸和保存李氏菌增菌肉湯(LB2) Listeria Enrichment Broth Base 9ml*20支/包50µg Xa因子蛋白 Factor Xa Protease -20℃保存125mL RNase-Free TE Buffer(無RNase的TE緩沖液),pH8.0 RNase-Free

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

單核細胞白血?。?span style="font-family:Calibri">THP-1 

規格

1×10?cells/T25培養瓶

分類

細胞系

貨號

GOY-01X0232

商品介紹:

名稱 單核細胞白血?。篢HP-1 

別稱THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1

種屬人類

年齡(性別)男性,1歲嬰兒

組織來源急性單核細胞白血病,單核細胞

生長特性懸浮細胞

細胞形態單核細胞

背景描述THP-1細胞對乳汁珠和激活的紅細胞有吞噬作用,無表面和胞質免疫球蛋白。THP-1細胞可以用佛波醇、TPA誘導單核細胞分化。

生物安全等級1

生長培養基RPMI-164010% FBS0.05mM β-mercaptoethanol1% P/S

推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~36-72小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

受體表達情況complement (C3), expressed;Fc, expressed

抗原表達情況HLA A2, A9, B5, DRw1, DRw2

基因表達情況lysozyme, HLA A2, A9, B5, DRw1, DRw2

注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CSNK1G2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

PRSS23 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

FEN1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

USP18 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

CTSH 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

WDR5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

CAPN3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

C1QC 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

METTL7A 基因全長OR

單核細胞白血?。?/span>THP-1 NOL1  增相關核仁抗原抗體 規格: 0.2mlIL-32/NK4  白介素32抗體 規格: 0.1ml

Phospho-Stathmin(Ser25)  磷酸化原基因蛋白18 規格: 0.1ml

100mg 肌球蛋白 Myoglobin -20℃保存

250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH7.5   Phosphate Buffer,0.5M, pH7.5   常溫保存

10次 百萬堿基級細菌(G+)DNAout  

1 管 Top腸桿菌 0 E.coli Strain -80℃保存

50T 人E-選擇素S128R基因多態性檢測試劑盒(PCR-RLFP)  低溫運輸,-20℃保存

1mL 可溶性B溶液,20mg/mL Amphotericin B Solution -20℃避光保存

2 ug pET-43.1 Ek/LIC pET-43.1 Ek/LIC 低溫運輸,-20℃保存

消毒液中和肉湯 Disinfectant Neutralization Broth 250g

抗生素檢定培養基 32 號  250g

100mg AMPPD AMPPD 4℃保存

 


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