細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小細胞肺癌細胞：NCI-H446(H446)

別稱H446; H-446; NCI-446; NCIH446

種屬人類

年齡（性別）男性，61歲

組織來源肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；小細胞肺癌

生長特性半貼半懸

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述NCI-H446細胞是從一位小細胞肺癌患者的胸水中建立的，NCI-H446細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。NCI-H446細胞是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種，表達神經(jīng)元*的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。NCI-H446細胞內(nèi)脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。C-myc DNA序列擴增約20倍，c-myc RNA比正常細胞增加15倍。最初，傳代培養(yǎng)基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml鐵傳遞蛋白、10nM 17-β-雌二醇、30nM)。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice (The cells form transplantable tumors with non-typical SCLC histology).

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 LRG1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 CGREF1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 AFM / Afamin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 SIGLEC6 / CD327 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 COL9A1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 DPP4 / DPPIV

小細胞肺癌細胞：NCI-H446(H446)FMNL1  成蛋白相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlMFAP1  微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

NBL1/DAND1  神經(jīng)母細胞瘤抑瘤蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

HIDE1/C19orfC38  19號染色體開放閱讀框38抗體 規(guī)格: 0.2ml

IFI78/MX1  干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體 規(guī)格: 0.1ml

10mL 超級雜交液（芯片） SuperHyb Solution for Chip -20℃保存

10mg 化丙啶干粉 PI Powder -20℃干燥避光保存

2 ug pcDNA6-Myc/His B pcDNA6-Myc/His B 低溫運輸，-20℃保存

支原體瓊脂培養(yǎng)基（含） Mycoplasma Agar Base 250g

25mg 熒光胺 Fluorescamine 室溫保存

500mL Mac Ewen Solution  Mac Ewen Solution  常溫保存

100mL RNase-free EDTA溶液,0.5 M,pH 8.0  常溫

TPP1/CLN2  細胞生抑制基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CD151/MER2(Ser30)  磷酸化CD151抗體 規(guī)格: 0.1ml