實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量　GDA (Guanine deaminase) 　1 Kit

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量　GP2 (Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2) 　100 ul

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量　GNL3 (Guanine nucleotide-binding protein-like 3) 　20 ul

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量　GPM6B (Neuronal membrane glycoprotein M6-b) 　100 ul

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量　COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) 　100 ul

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) 　100 ul

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) 　20 ul

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GMPR2 (GMP reductase 2) 　100 ul

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-14）活性熒光定量　PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) 　100 ul

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-14）活性熒光定量　TCN2(Transcobalamin-2) 　100 ul

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-14）活性熒光定量　GLG1 (Golgi apparatus protein 1) 　100 ul

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）明膠酶譜法（gelatin-zymography）電泳分析（MMP2/9）　GIN1 (Gypsy retrotransposon integrase-like protein 1) 　100 ul

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）酪蛋白酶譜法（casein-zymography）電泳分析（MMP1/3/7/12/13）　GCA(Grancalcin) 　100 ul

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）膠原蛋白酶譜法（collagen-zymography）電泳分析（MMP1/13）　H2AFX(Histone H2AX) 　1 Kit

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）羧甲基轉(zhuǎn)鐵蛋白（CM transferrin -zymography電泳分析（MMP7）　GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) 　100 ul

細(xì)胞/組織蛋白（基質(zhì)金屬蛋白酶）樣品制備　LGALSL (Galectin-related protein) 　100 ul
MMP-8 elisa試劑盒說明書Cluster of differentiation 40CD40分子種屬: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(假姬菇30)

Cluster of differentiation 4CD4分子種屬: Ruania│albidiflava白黃阮繼生氏菌

CD68CD68分子種屬: Gluconacetobacter│sp.葡糖酸醋桿菌屬

Cluster of differentiation 8CD8分子種屬: Agaricus│blazei Murrill#姬松茸

chemerin脂肪因子種屬: Streptomyces│xiangpingensis湘坪鏈霉菌

c-Jun N-terminal kinasesc-Jun氨基末端激酶種屬: Leucosporidium│scottii斯高特白冬孢酵母

CX3CL1;FractalkineCX3C趨化因子;fractalkine種屬: Paenibacillus│cookii庫氏類芽孢桿菌

CX3CR1CX3C趨化因子受體1種屬: Penicillium│solitum離生青霉

CXC-chemokine ligand 1CXC趨化因子配體1種屬: Virgibacillus│necropolis古墓枝芽孢桿菌

CXC-chemokine receptor 4CXC趨化因子受體4種屬: Trichaptum│abietinum (Dicks.) Ryvarden冷杉多孔菌

C-Reactive ProteinC-反應(yīng)蛋白種屬: Thermoproteales│sp.熱變形菌

C-PeptideC肽種屬: Articulospora│sp.節(jié)枝孢霉

Delta-like ligand4Delta-like ligand4種屬: Aeribacillus│pallidus蒼白好氧小桿菌

Dickkopf 1Dickkopf 1種屬: Ganoderma│sp.仙芝(靈芝屬之一種)

DNA methyltransferase 1DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1種屬: Desulfovibriosp.
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。