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甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 10:02:01瀏覽次數:157次

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貨號 GOY-01S6592
甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法檢測試劑盒公司正在出售的產品:DEPC水 500毫升
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商品屬性:

產品名稱

甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/48樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6592

商品介紹:

測定意義

MCS廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體基質中,與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環的調節。

測定原理:

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產生甲基檸檬酰,進一步水解產生甲基檸檬酸;該反應促使無色的DTNB轉變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

抗抗體 IgM(間接法二步法)Anti-Mevalonate Kinase Antibody人血紅蛋白C(HbC)elisa定量檢測試劑盒

大鼠分泌型磷脂A2Anti-MFAP5 Antibody人血管內皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)elisa定量檢測試劑盒

兔骨形成蛋白Anti-MIA Antibody人嗅素4(OLFM4)elisa定量檢測試劑盒

人干擾素調節因子Anti-MGST3 Antibody人肥胖抑制素(OB)elisa定量檢測試劑盒

鯉魚卵黃蛋白原Anti-MGST2 Antibody人性別決定區Y框蛋白3(SOX3)elisa定量檢測試劑盒

小鼠CD3分子Anti-MIA2 Antibody人蛋白3(PR3)elisa定量檢測試劑盒

魚類促性腺釋放Anti-MIA Antibody人嗜酸粒趨化因子受體(ECFR)elisa定量檢測試劑盒

兔骨保護素Anti-MID1 Antibody人熱休克蛋白90(HSP-90)elisa定量檢測試劑盒

甲基檸檬酸合酶(MCS)可見分光光度法檢測試劑盒噁唑 98%跨膜蛋白TMED4抗體

2-噻吩乙酰 98%狀受體相關蛋白3抗體

4-辛炔 99%味覺受體蛋白家族2亞9抗體

十八 ≥97.0% (GC)肥大類胰蛋白β2

草酰 98%化酪氨激B抗體

99%粘附分子1抗體

分析標準品,≥99.0% (GC)跨膜蛋白16A/鈣激活離子通道抗體

1,7-辛二炔  98%腫瘤壞死因子-α抗體

十八烷 99%腫瘤蛋白P53誘導蛋白11抗體

十八烷 分析標準品,≥99.5% (GC)味覺2型受體蛋白家族49抗體

十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)早期未分化視網膜及晶狀體蛋白EURL抗體

酮三化膦 99%特異激底物蛋白抗體

丁位辛內酯  98%微管相關同源蛋白TPX2抗體

4-戊烯 95%神經死亡誘導蛋白激抗體

鍺試劑 97%微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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