細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    雞胚成纖維細(xì)胞：UMNSAH/DF-1 

別稱UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1

種屬家雞

年齡（性別）10日齡

組織來源胚胎，自發(fā)永生化

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

背景描述UMNSAH/DF-1細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株，自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，傳代直到衰老；在衰老過程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿；不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒有觀察到克隆增殖，說明UMNSAH/DF-1細(xì)胞是永生化而沒有轉(zhuǎn)化。UMNSAH/DF-1細(xì)胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。

生物安全等級(jí)1

生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時(shí)間~22-36小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：39℃（Max.40℃，Min.38℃）

致瘤性No, in immunosuppressed mice. No, in semisolid medium.

注意事項(xiàng)1、該細(xì)胞培養(yǎng)難度較高，溫度波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞空泡增多； 2、該細(xì)胞為38℃~40℃培養(yǎng)，最佳培養(yǎng)溫度為39℃，37℃培養(yǎng)會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)，建議提前準(zhǔn)備專用培養(yǎng)箱； 3、受溫度波動(dòng)影響，收貨常見細(xì)胞空泡較多，穩(wěn)定培養(yǎng)后可恢復(fù)。

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

人 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

小鼠 ENG 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

甲型流感 H1N1 (A/WSN/33) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

小鼠 G

雞胚成纖維細(xì)胞：UMNSAH/DF-1 30次 一站式SDS-PAGE電泳套裝 One-Stop SDS-PAGE Pack 丙烯酰胺溶液4℃保存，上樣緩沖液需要-20℃保存，其余常溫保存

1g γ- 球蛋白 ( 牛血 ) γ-Globulins From Bovine Blood      -20℃保存

250mL MES Buffer,0.2M,pH6.0   MES Buffer,0.2M,pH6.0   常溫保存

50次 柱式骨骼DNAout Column Bone DNAOUT 常溫

1瓶 HP615細(xì)胞株 HP615 低溫運(yùn)輸和保存

50T 柯薩奇病毒A16型PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100次 古細(xì)菌+真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3（rDNA） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

1g 硫酸新干粉 Neomycin Sulfate Powder 4℃保存

EDIL3  表皮生因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

E Tag  E Tag標(biāo)簽抗體 規(guī)格: 0.1ml

UBE2U  泛素蛋白連接U抗體 規(guī)格: 0.2ml

MUG培養(yǎng)基 MUG Medium 100g