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小鼠膀胱移行上皮細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 15:39:17瀏覽次數:130次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0908
小鼠膀胱移行上皮細胞公司正在出售的產品:608-66-2衛矛 規格: 20mg
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產品名稱

小鼠膀胱移行上皮細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0908

商品介紹:

名稱 小鼠膀胱移行上皮細胞

2.組織來源:膀胱組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠膀胱上皮細胞分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,位于骨盆內,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環形肌,形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:組成過濾屏障內壁的重要部分;在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子;受損后影響系膜細胞和上皮細胞,進而影響腎臟病變。

5.方法簡介:

()實驗室分離的小鼠膀胱移行上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的小鼠膀胱移行上皮細胞Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-M058

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

消毒液中和肉湯 Disinfectant Neutralization Broth 250g 0.156-10 ng/mL 豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

100mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 基鹽 (BCIP) BCIP -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit

250mL Veronal Buffered Saline with Mg++ and

小鼠膀胱移行上皮細胞鹽瓊脂 Mannitol Salt Agar 250g

25g N-2-  -N’-2- 乙基磺酸鈉 HEPES,Sodium Salt 室溫保存

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.5   MOPS Buffer,0.5M,pH6.5   常溫保存

2 ug pECFP- C1 pECFP- C1 低溫運輸,-20℃保存

TP53I11  瘤蛋白P53誘導蛋白11抗體 規格: 0.2ml

MIP2/GRO Beta/CXCL2  巨噬細胞癥蛋白2( GROβ)抗體 規格: 0.1ml

Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360)  磷酸化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 規格: 0.1ml

Laminin alpha 5  層粘蛋白α5抗體 規格: 0.1mlCtIP/RBBP8  視網膜母細胞瘤結合蛋白8抗體 規格: 0.2ml

PAX6  轉錄因子Pax6抗體 規格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/HRP  辣根過氧化物標記的羊抗豚鼠IgG 規格: 0.1ml

Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein  Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 規格: 0.2ml

FasL/CD178  兔抗FasL抗體。 規格: 0.1ml

PCDHGA10  原鈣粘蛋白γ10抗體 規格: 0.2ml

 


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