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當前位置:上海谷研實業有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 大鼠表皮黑色素細胞

大鼠表皮黑色素細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 08:44:04瀏覽次數:175次

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進口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X1012
大鼠表皮黑色素細胞公司正在出售的產品:23513-14-66-姜 規格: HPLC≥98%;20mg
規格: 100mg
紫蘇子對照藥材 規格: 1g
15356-70-4DL- 規格: 20mg
磷氨丁三 規格: 100mg
115810-12-3土貝母乙 規格: HPLC≥98%;20mg
大風藤對照藥材 規格: 1g
二 規格: 20mg
35286-58-9地榆皂I 規格: HPLC≥9

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠表皮黑色素細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1012

商品介紹:

名稱 大鼠表皮黑色素細胞

2.組織來源:皮膚組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠表皮黑色素細胞分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。黑色素細胞是皮膚產生和維持色素的主要細胞,起源于神經嵴,后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細胞的異常或功能的失常導致了一系列難治性色素性疾病的發生,如黃褐斑等。表皮黑色素細胞主要分布于位于表皮的基底層,與表皮細胞共同組成表皮黑素單位,其主要功能是產生黑素小體保護皮膚免受損害。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠表皮黑色素細胞先中性消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠表皮黑色素細胞S-100免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R099

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態長梭形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

1張 硝酸纖維素膜,13×20 cm (Amersham) Nitrocellulose Membrane 常溫保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Placenta growth factor

2 ug SD1211- 1 SD1211- 1 低溫運輸,-20℃保存 46.9-3000 pg/mL ELISA Kit for Human Pancreatic prohormone

50次 液體樣品DNAout Liquid Sample DNAOUT 常溫(溶液A

大鼠表皮黑色素細胞我妻氏培養基基礎 Wagstsuma Agar Base 250g

10塊 LB平板培養基(LB-Kan平板) LB Petri Dish 低溫

5g  Uracil 室溫保存

緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP試驗用培養基) Methyl Red Voges Proskauer Broth 250g

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即用型無菌瓶裝液體培養基  

15mL 非凍型尿液DNA保存液 Urine DNALOCKER 室溫

phospho-ECT2 (Thr790)  磷酸化上皮細胞轉化蛋白2抗體 規格: 0.1ml

RIP3  受體結合激3抗體 規格: 0.2mlADAM20  去整合素樣金屬蛋白20抗體 規格: 0.2ml

MAD2  有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體 規格: 0.2ml

MAP4  微管相關蛋白4抗體 規格: 0.1ml

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