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M199 培養基

參  考  價:1 - 560 /盒
具體成交價以合同協議為準
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  • 所在地

    上海市

更新時間:2025-05-30 16:41:22瀏覽次數:198次

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保存條件 2-8℃、避光 貨號 GOY-XP5173
產品規格 500ml 用途 僅供科研實驗
M199 培養基早期合成培養基:含50余種成分(包括嘌呤、嘧啶、激素前體等),常用于病毒培養、疫苗生產、雞胚細胞研究及某些特殊細胞系的維持。

M199 培養基


產品名稱

M199 培養基

貨號

GOY-XP5173

規格

500ml

用途

僅供科研研究實驗

產品介紹

1950年,Morgan成功研制出具有確定化學成分的細胞培養液,即M-199,主要用于雞胚成纖維細胞培養。此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞,并能培養轉染的細胞。

 

M199 培養基

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸(儲存條件2-8℃ 避光儲存)產品保質期12個月。


M199 培養基

M199 培養基

細胞復蘇?:

從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?:

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?:

當細胞長到80%~90%時,進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液,加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。

棄上清,加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中,補加新鮮培養基。

做好標記,放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?:

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。

加入適量的凍存液(如90%的培養基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

M199 培養基

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

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