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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>兔原代細(xì)胞>> 原代兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
組織來(lái)源 | 視網(wǎng)膜組織 | 貨號(hào) | GOY-01X0689 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
原代兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔視網(wǎng)膜色素上皮分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,兩層間在病理情況下可分開(kāi),稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專(zhuān)司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專(zhuān)管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道;主要是由單層色素上皮細(xì)胞所構(gòu)成,排列十分規(guī)則。視網(wǎng)膜色素上皮參與shi黃醇循環(huán),吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性,并分泌多種生長(zhǎng)因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。細(xì)胞呈多角形,細(xì)胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞無(wú)再生能力,細(xì)胞死亡后不被替換,而是鄰近的細(xì)胞向側(cè)面滑動(dòng),以填補(bǔ)死亡細(xì)胞遺留下來(lái)的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與shi黃醇循環(huán),吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性,并分泌多種生長(zhǎng)因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜色素上皮采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜色素上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
英文名稱(chēng) | Rabbit Retinal Pigment Epithelial Cells | 組織來(lái)源 | 視網(wǎng)膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 貨號(hào) | GOY-01X0689 |
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時(shí)培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時(shí)間不能超過(guò)24h。
2. 從消化道、周?chē)袎乃澜M織等污染因素存在的區(qū)域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁,可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1~2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染,一旦發(fā)現(xiàn),要及時(shí)清除。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
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