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原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 肺組織 貨號 GOY-01X0733
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
原代兔肺泡巨噬細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s人肺鱗癌細(xì)胞小鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞兔原代腸粘膜上皮細(xì)胞兔原代輸尿管平滑肌細(xì)胞豬原代睪丸間質(zhì)細(xì)胞兔原代小梁網(wǎng)細(xì)胞狗原代II型肺泡上皮細(xì)胞小鼠原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞兔原代視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞大鼠原代小腸成纖維細(xì)胞

原代兔肺泡巨噬細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

英文名稱

Rabbit Alveolar Macrophage Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0733

組織來源

肺組織

細(xì)胞形態(tài)

巨噬細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 利多ka因(12mM)

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

兔肺泡巨噬分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲存器官,為結(jié)核病的研究提供了重要的材料。
方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺泡巨噬采用機(jī)械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺泡巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代兔肺泡巨噬細(xì)胞


原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

原代兔肺泡巨噬細(xì)胞

人肝癌細(xì)胞SNU-387(STR鑒定正確)

人類甲狀腺未分化癌 8305C(STR鑒定正確)

人原位胰腺腺癌細(xì)胞BxPC-3(STR鑒定正確)

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人小細(xì)胞肺癌 NCI-H2227(STR鑒定正確)

生殖支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠黑色瘤細(xì)胞B16(種屬鑒定)

發(fā)酵支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人支氣管上皮樣細(xì)胞 16HBE HBE135-E6E7(STR鑒定正確)

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人肝癌細(xì)胞BEL-7402 (STR鑒定正確)

貓支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系Phoenix-ECO (STR鑒定正確)

差異支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠乳腺上皮細(xì)胞

山羊支原體山羊肺炎亞種探針法熒光定量PCR試劑盒

人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-175 VII(STR鑒定正確)

貓血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人皮膚黑色瘤細(xì)胞SK-MEL-1(STR鑒定正確)

人支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞LLN(STR鑒定正確)

豬肺炎支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠黑色瘤帶熒光B16-F10+luc(種屬鑒定)

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人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-1-B(STR鑒定正確)

原代兔肺泡巨噬細(xì)胞豬滑液支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

人胰腺癌細(xì)胞 Panc 0813(STR鑒定正確)

衣阿華支原體探針法熒光定量PCR試劑盒

貓支原體(MF)檢測試劑盒(熒光PCR法)

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