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原代兔胰腺星狀細(xì)胞

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更新時間:2025-04-29 10:09:29瀏覽次數(shù):52次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 胰腺組織 貨號 GOY-01X0872
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實驗
原代兔胰腺星狀細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞豬原代甲狀腺上皮細(xì)胞人原代膽脂瘤細(xì)胞大鼠原代α-SMA陽性 腎周肌成纖維細(xì)胞人原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠原代肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞人原代子宮瘤細(xì)胞大鼠原代腎上皮細(xì)胞人原代睪丸支持細(xì)胞兔原代腹腔巨噬細(xì)胞

原代兔胰腺星狀細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代兔胰腺星狀細(xì)胞

英文名稱

Rabbit Pancreatic Stellate Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0872

組織來源

胰腺組織

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代兔胰腺星狀細(xì)胞

原代兔胰腺星狀細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

兔胰腺星狀分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳suan氫鈉、yi蛋白酶原、脂肪酶、淀粉mei等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長抑su,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達(dá)Desmin蛋白,活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA,而不再表達(dá)Desmin,說明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活,傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。
方法簡介:

公司實驗室分離的兔胰腺星狀采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的兔胰腺星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代兔胰腺星狀細(xì)胞

原代兔胰腺星狀細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。

原代兔胰腺星狀細(xì)胞

人甲狀腺癌細(xì)胞 Ocut-2C (STR鑒定正確)

倉鼠卵巢細(xì)胞LEC-1(種屬鑒定)

人膜間皮細(xì)胞MET-5A(STR鑒定正確)

腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒

肺癌紫杉耐藥株A549+Taxol(STR鑒定正確)

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒

人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞HAL-01(STR鑒定正確)

腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠膀胱癌細(xì)胞MB49(種屬鑒定)

腺病毒C型探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠腎小管上皮細(xì)胞TCMK-1(種屬鑒定)

腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒

大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3(種屬鑒定)

羊口瘡病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗人卵巢癌);OC1C3

梅恩君病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞95-D(STR鑒定正確)

腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠前列腺癌細(xì)胞帶熒光RM-1+LUC(種屬鑒定)

腺熱埃里希體探針法熒光定量PCR試劑盒

人胚肝二倍體細(xì)胞 CCC-HEL-1(STR鑒定正確)

著色霉探針法熒光定量PCR試劑盒

人皮膚鱗癌細(xì)胞A-431(STR鑒定正確)

緊密著色霉探針法熒光定量PCR試劑盒

人肝癌亞力山大細(xì)胞PLC/PRF/5(STR鑒定正確)

原代兔胰腺星狀細(xì)胞佩氏著色霉探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠雜交瘤(抗CD2)細(xì)胞OKT 11(種屬鑒定)

克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

馬流感病毒(EIV)檢測試劑盒(熒光PCR法)

產(chǎn)氣克雷伯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒


原代兔胰腺星狀細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。



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