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原代兔外周血單個核細胞

參  考  價:1 - 600 /件
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    上海市

更新時間:2025-04-29 10:12:11瀏覽次數:50次

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原代細胞
細胞培養
組織來源 血液組織 貨號 GOY-01X0880
產品規格 5×105Cells/T25培養瓶 細胞形態 圓形
生長特性 懸浮 用途 僅供科研研究實驗
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原代兔外周血單個核細胞


產品名稱

原代兔外周血單個核細胞

英文名稱

Rabbit Peripheral Blood Mononuclear Cells

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

貨號

GOY-01X0880

組織來源

血液組織

細胞形態

圓形

培養信息:

培養基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代兔外周血單個核細胞

原代兔外周血單個核細胞

細胞簡介:

兔外周血單個核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。
方法簡介:

公司實驗室分離的兔外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:

公司實驗室分離的兔外周血單個核經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 


原代兔外周血單個核細胞

原代兔外周血單個核細胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,

4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。

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原代兔外周血單個核細胞

1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:

取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。

2、細胞傳代:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

3、細胞凍存:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。

4、細胞復蘇:

1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。



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