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細胞系存活率低該如何解決

時間:2017/9/21閱讀:395
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在解凍細胞系時,發現會出現存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題, 是什么原因導致,該怎么進行解決?現在我們大家一起往下看吧。或許能給您的實驗問題的解決找到答案!
低存活率
出現低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:
1.解凍過程中細胞裂解
推薦的解決方案:可預期到一定量的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為106至107細胞/毫升。
2.解凍過程中的問題
推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養物,保存時間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應立即開始培養。
3.對冷凍液過敏
推薦的解決方案:A.*或部分更換培養基,減少培養基中冷凍液的量。在24小時后更換培養液體可全部去除冷凍液。
B.留出更多時間供培養物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數期。
4.被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養物的年齡
推薦的解決方案:解凍Z近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態的時間越長,存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數期。
大量細胞碎片
出現大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:
1.冷凍時細胞密度過低
推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉移到預熱的培養基中。
2.不適當的冷凍過程
推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當的技術,并確保使用了適量和適合的冷凍液。
生長緩慢
出現生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:
1.培養瓶的大小
推薦的解決方案:一些細胞系在培養基中傾向于維持一定的密度。將培養物轉移到較小的培養瓶中,使細胞密度上升;如,根據培養基的體積,從75cm2的燒瓶轉移到2或3個25cm2的燒瓶中。
2.細胞密度過低
推薦的解決方案:提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養容器,或解凍多個試管來進行培養。
規格:    Multi-class antibodies    Anti-Beta-Actin  β-肌動蛋白抗體(內參抗體)     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽1-40(C端)抗體     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid 1-42(CT)  β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-16)   β淀粉樣肽(1-16)抗體(小鼠、大鼠)     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-16) (human)  β淀粉樣肽(1-16)抗體(人)     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-28)  β淀粉樣肽(1-28)抗體     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-28)  β淀粉樣肽(1-28)抗體     0.1ml
規格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-40)  β淀粉樣肽(1-40)抗體     0.1ml
細胞系

 

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