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原代細胞實驗廢棄的處理方法

時間:2017/12/14閱讀:264
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原代細胞上清
    取細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
4、  細胞裂解液
1)  吸去培養板內的培養基,用胰酶消化細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2)  收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。
3)  加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
4)  將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。
5)  4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
組織勻漿液
1)  將組織樣本用PBS (0.01 [錨點] [錨點] M, PH 7.4) 沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質。
2)  將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應盡量小,便于勻漿得更充分
3)  將組織按一定的比例加入預冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時置于冰上或冰浴中。(通常按組織重量:PBS體積=1:9的比例勻漿,例如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,檢測后計算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數)
4)  原代細胞吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本
供檢查用    50mg    101109-201001    山梨醇
供HPLC法    200mg    101116-201001    地塞米松磷酸酯
供檢查用    50mg    101121-201001    非諾貝特雜質Ⅰ
供檢查用    50mg    101122-201001    非諾貝特雜質Ⅱ
供檢查用    30mg    101124-201001    2-巰基
供檢查用    100mg    101126-201001    1,3-丙二醇
供HPLC法    50mg    101128-201001    可的松
供檢查用    50mg    101132-201001    
供HPLC含量    20mg    101135-201001    消旋山莨菪堿雜質I
原代細胞

 

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