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如何選擇ATCC細胞術常用的熒光素 ?

時間:2018/4/12閱讀:211
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ATCC細胞儀測定常用的熒光染料有很多種,我們如何來選擇ATCC細胞儀測定的常用熒光染料呢?以下簡單介紹了熒光素選擇的幾個原則。
1. 抗原的密度
① 高表達的抗原可選擇幾乎所有的熒光素;
② 低密度表達的抗原需要可提供較高S/N比值的熒光素如PE/APC。
2. 自發熒光
① 每種細胞群都有不同水平的自發熒光;
② 所有的熒光通道均可觀察到自發熒光,但自發熒光強度在波長較長時迅速降低;
③ 對自發熒光較強的細胞,選擇發射波長較長的熒光素(如APC)可得到較好的S/N比值;
④ 對自發熒光比較弱的細胞,發射波長較長的熒光素對S/N提高沒有明顯的改善。可選用FITC。 
3. ATCC細胞非特異結合
① 許多熒光抗體可產生低水平的非特異結合,使陰性細胞群的熒光超出自發熒光;
② 非特異結合由下列因素引起:
單克隆抗體的同型抗體:一些IgG同型抗體可能與一些細胞上的Fc受體結合;
所用的熒光素:羰花青染料(如CY3、CY5、CY5.5、CY7)和Tex-Red直標的抗體及一些復合染料標記的抗體在標記某些亞群的細胞時有時會提高結合率;對CY5來說,是因為該染料與低親和力Fc受體的極低親和力相互作用。這也是復合染料PE-CY5的特性。
110877-200001    含量測定    20mg    兒茶素
110878-200102    含量測定    20mg    表兒茶素
110879-200202    含量測定    20mg    腺苷
110882-200605    含量測定    20mg    木蘭脂素
110883-200502    含量測定    20mg    葫蘆巴堿
110886-200001    含量測定    20mg    腺嘌呤
110887-200202    薄層鑒別    20mg    尿苷
110888-200503    含量測定    20mg    環維黃楊星D
110889-200102    鑒別    100mg    蘇氨酸 
ATCC細胞

 

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